两性生活影片 天津本生详解甘油三酯(TG)检测试剂盒
发布日期:2024-12-16 21:15 点击次数:198

居品简介
甘油三酯(Triglyceride,TG)又称三酰甘油,是3分子长链脂肪酸和甘油变成的脂肪分子,是东谈主体内含量最多的脂类,大部分组织均不错哄骗甘油三酯理会产物供给能量,同期肝脏、脂肪等组织还不错进行甘油三酯的合成,用酶学花式测定 TG 是生化检测中的常用花式, 其秉性是:1、智谋度、准确度、精密度均高;2、使用柔软的响应条目;3、操作方便;4、适用于自动分析仪。 本公司甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等,其旨趣是甘油三脂被 LPL 水解为甘油和脂肪酸,后者经甘油激酶和 ATP 磷酸化,G-3-P 被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并产生过氧化氢,再历程氧化物酶(POD)催化两性生活影片,使 4-氨基安替比林与酚(三者合称 PAP)响应两性生活影片,生成红色benhun醌亚胺(Trinder 响应)两性生活影片,酶标仪在 500~520nm 处进行比色测定,用于东谈主或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三脂含量定量测定。该试剂盒仅用于科研限制,不适用于临床会诊或其他用途。
组分:
称呼
规格
储存
试剂(A): GPO-PAP责任液
Good's Buffer
30mL
-20℃ 避光
LPL、GK、GPO
过氧化物酶(POD)
4-氨基安替比林
对氯酚
试剂(B): Glycerol 规范(1.7mmol/L)
1mL
4℃ 避光
试剂(C): ddH2O
1mL
RT
自备材料:
1、生理盐水或PBS。
2、96 孔板或离心管、小试管。
3、水浴锅或恒温箱。
4、酶标仪或分光光度计。
5、全自动或半自动生化分析仪。
操作要领(仅供参考):
一、样本处罚
1、血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本均永别出的血清或血浆不应有溶血,平直检测,如跳动线性界限,用生理盐水稀释后检测。
2、细胞样本
a:取适量的细胞(一般保举>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取千里淀。
b:.用 PBS 或生理盐水清洗 1-2 次,1000g离心10min,弃上清,留取千里淀。
c:加入200-300μl 的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条目下超声幻灭细胞,功率300W,每次3-5s,休止30s,叠加3-5次;亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心;亦可用1-2% Triton X-100 冰浴 30-60min,制备好的裂解液不可离心。
3、组织样本:准确称取适量组织样本,按质地(g):生理盐水或PBS(mL)=1:9的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条目下手动或机械匀浆,2500-3000g 离心10min,取上清待用。
二、酶标仪TG测定操作:
1:按下表次第加入试剂:
加入物(μL)
空缺孔
规范孔
待测孔
ddH2O
3
-
-
Glycerol 规范(1.7mmol/L)
-
3
-
待测样本
-
-
3
GPO-PAP 责任液
300
300
300
2:充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3:酶标仪测定 500-520nm 吸光度,以空缺孔调零,读取规范孔和各待测孔的吸光度。
三、分光光度计(1ml 比色杯)、半自动生化分析仪 TG 测定操作:
1、按下表次第加入试剂:
加入物(mL)
空缺管
规范管
待测管
ddH2O
0.01
-
-
Glycerol 规范(1.7mmol/L)
-
0.01
-
待测样本
-
-
0.01
GPO-PAP 责任液
1
1
1
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度计测定500-520nm吸光度,空缺管调零,读取规范管和各待测管的吸光度。
四、普通分光光度计(2mL比色杯)TG 测定操作:
1、按下表次第加入试剂:
加入物(mL)
空缺管
规范管
待测管
ddH2O
0.02
-
-
Glycerol 规范(1.7mmol/L)
-
0.02
-
待测样本
-
-
0.02
GPO-PAP 责任液
2
2
2
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度计测定500-520nm吸光度,空缺管调零,读取规范管和各待测管的吸光度。
五、全自动生化分析仪 TG 测定操作:
1、按下表次第加入试剂:
加入物((μL)
空缺管
规范管
待测管
ddH2O
3
-
-
Glycerol 规范(1.7mmol/L)
-
3
-
待测样本
-
-
3
GPO-PAP 责任液
300
300
300
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、全自动生化分析仪测定 500-520nm 波所长吸光度,以空缺管调零,读取规范管和各待测管的吸光度。
机器参数:
主波长/次波长
500/600nm
响应类型
绝顶法
响应看法
升响应(+)
策画公式:
血清、血浆等液体样本(空缺调零):
TG(mmol/L)={(待测管吸光度-空缺吸光度)/(规范管吸光度-空缺吸光度)}×1.7mmol/L
血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪):
TGmmol/L)=(待测管吸光度/(规范管吸光度)×1.7mmol/L
细胞、组织等样本(空缺调零):
TG(mmol/L)={ ( 待 测 管 吸 光 度 - 空 白 吸 光 度 )/( 标 准 管 吸 光 度 -空 白 吸 光 度 ) }×1.7mmol/L÷待测样本浓度(mg/mL)
细胞、组织等样本(全自动生化分析仪):
TG(mmol/L)=(待测管吸光度/(规范管吸光度)×1.7mmol/L÷待测样本浓度(mg/mL)
参考区间:
健康成年东谈主:
理念念界限:<1.7mmol/L(<150mg/dl)
边际升高:<1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl)
升高:<2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl)
很高:≥565mmol/L(≥500mg/dl)
性能方针:
外不雅
无色至淡黄色清亮液体
线性界限
0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl),R2>0.98
智谋度
检测下限 0.05mmol/L(4mg/dl)
变异总计
批内<5%,批间<8%,总特别<10%
空缺吸光值
<0.2(1cm 光径)
打扰身分
胆红素<205μmol/L;血红卵白<6g/L;EDTA、肝素抗凝时,对截止无昭着影响。
踏实性
密闭,6个月
注重事项:
1、上述低温试剂幸免反复冻融,以免失效或恶果下跌。
2、本法可平直用于检测脑脊液中的TG含量,但不可平直检测尿液中的TG含量,因为未经处罚的尿液中含有回复性物资,影响过氧化物酶响应。
3、待测样本如不可实时测定,应置于2-8℃保存,3天内踏实。
4、本法线性界限可达9.0mmol/L,要是样本TG浓渡过高,截止可能呈假性镌汰,应用生理盐水稀释后重测,截止乘以稀释倍数。
有用期:
-20℃ 避光, 6个月有用。
人妖ts